6 factores para mejorar los resultados del conteo celular

Los grandes avances en la producción de productos biológicos, la terapia celular y génica y la medicina regenerativa han planteado la necesidad de una caracterización celular de alta precisión. Además, las diversas complejidades de las fuentes biológicas involucradas en estos estudios y tratamientos revolucionarios requieren diferentes condiciones optimizadas, formulaciones y pasos de bioprocesamiento según el uso previsto.

Para ayudar a abordar estos desafíos, los expertos en conteo de células de Nexcelom, ahora parte de PerkinElmer, han identificado seis puntos clave para aumentar la confianza de los resultados del conteo de células que implican la selección de materiales de origen, metodologías e instrumentación en función de los requisitos específicos de la célula y la lectura de datos deseada.

El logro de recuentos de células, porcentajes de viabilidad y mediciones de biomarcadores precisos comienza con la selección y evaluación del método de recuento de células apropiado. La selección de este método incluye decidir el ensayo de recuento de células correcto, los reactivos, los consumibles y el análisis de software necesarios para un tipo de célula en particular.
Cuando se busca validar métodos de conteo de células para ensayos preclínicos, ensayos clínicos y desarrollo de procesos, las Normas de conteo de células de la Organización Internacional para la Estandarización (ISO) Parte 1 y 2 brindan un marco para evaluar el rendimiento de cualquier método de conteo de células.

Navegación por la selección del método de conteo de células

PerkinElmer y Nexcelom reconocen la importancia de ayudar a los investigadores a aplicar los estándares de recuento de células ISO a sus flujos de trabajo y han destacado los factores que pueden influir en la calidad de los resultados del recuento de células.

A través de colaboraciones con clientes y estudios internos, el equipo de Investigación y Desarrollo desarrolló estrategias basadas en los estándares ISO para crear una Guía práctica de selección de métodos de conteo de células para aumentar la calidad de los resultados del conteo de células . Estas consideraciones permiten a los investigadores adherirse fácilmente a las recomendaciones ISO y garantizar mediciones de conteo de células de alta calidad.

Seis factores clave que afectan la selección de métodos de conteo de células y la calidad de las mediciones de conteo de células:

  1. Determinar la información deseada necesaria del resultado del conteo de células  (para garantizar que sea adecuado para el propósito), como la digestión del tumor para el análisis del transcriptoma basado en una sola célula, el procesamiento de tejido de ratón para los ensayos de citotoxicidad o el aislamiento de PBMC humanas para el análisis de inmunofenotipado. etc.
  2. Investigue la composición y la morfología de la muestra celular , donde es importante conocer la composición celular (varios tipos de células, restos de partículas, impurezas químicas y medio de suspensión), así como su apariencia visual.
  3. Seleccione el principio de ensayo de recuento de células apropiado para el resultado previsto , como el recuento de células muertas, vivas y totales, la viabilidad o el análisis de población celular.
  4. Investigue las capacidades del instrumento y seleccione el sistema de conteo de células apropiado , donde el sistema consta de reactivos, consumibles, instrumentos y algoritmos de software.
  5. Considere todos los aspectos del proceso de recuento de células, incluidos los pasos preparatorios , incluido el muestreo, la dilución y la tinción, que son fundamentales para la preparación adecuada de la muestra.
  6. Actualice regularmente la base de conocimientos y la capacitación operativa para garantizar resultados de conteo de células consistentes.

En cada una de las seis áreas, hay detalles adicionales sobre cómo mantener las pautas, cumplir con los estándares y garantizar la selección adecuada del método de recuento de celdas en función de la experimentación individualizada.

Obtenga más información sobre cómo comprender los estándares de recuento de células ISO en el seminario web relacionado de Nexcelom Aplicación de los estándares de recuento de células ISO para productos de terapia celular y génica .

Referencias:

  1. Organización Internacional de Normalización (ISO). Norma ISO de recuento de células Parte 1 . ISO 20391-1:2018 Biotecnología – Conteo de células – Parte 1: Orientación general sobre métodos de conteo de células. Norma ISO de recuento de células Parte 2 . ISO 20391-2: 2019 Biotecnología – Conteo de células – Parte 2: Diseño experimental y análisis estadístico para cuantificar el rendimiento del método de conteo
  2. Aplicación práctica de la evaluación y comparación del rendimiento del método de conteo de células derivado de los estándares de conteo de células ISO, partes 1 y 2. Y Huang, J Bell, D Kuksin, S Sarkar, LT Pierce, D Newton, J Qiu & LLY Chan. Información sobre terapia celular y génica 2021; 7(9), 937–960 (DOI: 10.18609/cgti.2021.126)
  3. Selección práctica del método de conteo de células para aumentar la calidad de los resultados del conteo de células basado en los estándares de conteo de células ISO Parte I  Sitio web de Nexcelom
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