8 avances en el diseño de LC/MS/MS que mejoran el flujo de trabajo

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LC/MS/MS es quizás uno de los métodos bioanalíticos más comunes utilizados en la actualidad, que ofrece una detección ultrasensible en el rango de varias partes por millón y, a veces, miles de millones. La especificidad única de la espectrometría de masas en tándem proporciona una mayor flexibilidad para las separaciones de LC, ampliando las aplicaciones que pueden utilizar LC/MS/MS. Se utiliza en una variedad de aplicaciones que incluyen monitoreo ambiental, procesamiento de alimentos, industrias farmacéutica, agroquímica, biotecnológica, toxicológica y cosmética.

Echar un vistazo más de cerca a LC/MS/MS permite descubrir cómo funciona este método innovador y cómo las innovaciones clave en su diseño están configuradas para cambiar el panorama al simplificar los flujos de trabajo y generar resultados más precisos.

La utilización de cromatografía líquida (LC) en tándem con múltiples espectrómetros de masas (MS) de cuadrupolo genera una metodología de prueba analítica optimizada, denominada LC/MS/MS. El método LC/MS/MS primero se basa en LC para separar y concentrar los componentes de la muestra antes de llegar a la MS. Dentro de la configuración de triple cuadrupolo, el primer cuadrupolo ioniza las moléculas del analito, el segundo cuadrupolo fragmenta iones moleculares seleccionados y un tercer cuadrupolo aísla selectivamente los iones para medirlos a través de un detector.

Después de la separación cromatográfica, las moléculas se ionizan y pasan a través de un conjunto de imanes para separar aún más las moléculas utilizando su relación masa-carga. La separación magnética se detecta usando la corriente de la molécula, derivada de las partículas cargadas que chocan con un detector. La corriente es el componente de detección clave, mientras que la masa permanece sin ser detectada. Por lo tanto, dos moléculas que se ionizan simultáneamente, pero que tienen masas diferentes, se pueden detectar de forma independiente mediante MS. Además, si las masas de dos moléculas ionizadas son iguales pero tienen cargas diferentes, todavía se pueden detectar de forma independiente mediante la detección de MS.

Múltiples eventos de ionización mejoran aún más la especificidad de LC/MS/MS, con un segundo proceso de ionización diseñado para fragmentar las moléculas en iones secundarios que tienen su propia relación masa-carga y pueden estar sujetos a detección. 1

Los sistemas LC/MS/MS de próxima generación están incorporando innovaciones de diseño clave que mejoran la sensibilidad y el rendimiento.

8 innovaciones de diseño a tener en cuenta al evaluar un sistema LC/MS/MS 

  1. Tecnología basada en flujo

La tecnología basada en flujo mejora el sistema LC/MS/MS al utilizar gas caliente para lograr una desolación eficiente y evitar que los iones choquen con las paredes laterales, lo que minimiza las necesidades de limpieza y mejora la sensibilidad. En los sistemas LC/MS/MS como los sistemas QSight® triple quad de PerkinElmer , los iones se transfieren desde la interfaz HSID a Laminar Flow Ion Guide™ del sistema, luego se mueven a la región de análisis mediante un flujo de gas de fondo. Por lo tanto, no son necesarios campos eléctricos axiales y el operador no tiene que preocuparse por las fluctuaciones de campo. Además, se eliminan la deriva del instrumento y la reoptimización y el mantenimiento frecuentes para mejorar la productividad.

  1. Diseño de electropulverización de flujo coaxial

El diseño de electropulverización de flujo coaxial evita la dispersión de especies de carga similares frente al orificio de muestreo, lo que optimiza el muestreo de iones y la sensibilidad. Sin flujo cruzado, se reduce la formación de turbulencias, lo que minimiza la fluctuación de iones.

  1. Filtros de masas de alto rendimiento

Los filtros de masa de alto rendimiento mejoran la resolución, la selectividad y la relación señal/ruido sin comprometer la sensibilidad ni la transmisión.

  1. Entradas de iones de funcionamiento independiente

Las entradas de iones que funcionan de forma independiente permiten a los usuarios recopilar datos en dos modos complementarios, maximizando la salida de una sola inyección.

  1. Células de colisión triple cuádruple

El diseño de las celdas de colisión cuádruples triples establece un campo eléctrico alto en la entrada y un campo eléctrico bajo en la salida, generando un movimiento iónico rápido por gradiente de campo. Esto promueve una fragmentación rápida y eficiente (MRM rápidos), acortando el tiempo de ciclo sin diafonía.

  1. Fuente de sonda dual

La configuración de fuente dual mejora el rendimiento al cambiar entre los modos de ionización por electropulverización (ESI) o ionización química a presión atmosférica (APCI) y permite aplicaciones combinadas con polaridades iguales u opuestas. Los datos se pueden recopilar en dos modos complementarios, maximizando la salida de una sola inyección.

  1. Diseño de interfaz de autolimpieza

Se estima que algunos diseños de interfaz de autolimpieza proporcionan un 15 % más de tiempo de actividad que los sistemas LC/MS/MS convencionales. El gas caliente brinda funcionalidad de limpieza, mientras que las especies cargadas son arrastradas y desolvatadas, lo que reduce el ruido químico y proporciona una mayor relación señal-ruido.

  1. Detección mejorada

Se utiliza un dínodo de alta energía para atraer iones positivos y hacer que colisionen con el dínodo para formar electrones, mientras que los iones negativos se detectan a partir del conteo de pulsos. Esto permite la detección casi simultánea de iones positivos y negativos sin necesidad de conmutación de alto voltaje.

La innovación se puede definir como la generación exitosa de nuevas ideas para crear técnicas, entendimientos y procesos sin precedentes. Descargue el folleto para conocer cómo el LC-MS/MS PerkinElmer QSight incorpora las últimas tecnologías.

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